法医学进展与实践(第二卷) Advances & Practices in Forensic Medicine 2 

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人类D18S535、D19S253、D19S400位点在法医学中的应用
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陈国弟    辛军平    张林
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华西医科大学法医学院
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随着对人类DNA序列的不断深入了解,已发现许多短串联重复序列(STR)具有遗传多态性,这些
遗传多态性位点除在人类群体遗传学及临床疾病的研究工作中起了重要的作用外,近几年也广泛应
用于法医学的亲子鉴定及个人识别。过去我们已对D18S535、D19S253及D19S400进行了群体遗传学
的研究[1.2]。由于三个位点在中国汉放族群体中基因频率分布均较好,个人认别机率为0.9以上,表
型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。我们将三个位点用于法医学的亲子鉴定及个人识别。现报告
如下:

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材料与方法

1.材料

(1)亲子鉴定样品:均为自愿要求作亲子鉴定的夫妇,采用静脉抽血3ml。

(2)物证检材料:由公检法送来我室的血痕、尸骨、精斑以及毛发。

2.方法

(1)DNA提取:新鲜血样品0.5ml,冻溶后采用酚氯仿提取方法;血痕及毛发采用Chelex提取方法,
精斑采用二步消化酚氯仿提取法;骨头经处理后,将骨粉用匀浆器制成乳浊液;用酚氯仿法提取。

(2)PCR扩增:扩增体积25m l,模板DNA2~4m l(含DNA量2~30ng),除新鲜血样提取的DNA样品未加牛血清白蛋白外,其于均在反应液中加有
牛血清白蛋白。扩增条件为94℃ 45s; 58℃ 30s; 72℃ 30s。循环25~30个周期。

(3)分型:采用6%~8%聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳;0.2%硝酸银染色,乙酸固定。

结果

1.D19S400位点:83例亲子鉴定中,17例被排除父权,其中D19S400参与排除父权13例。83例亲子
鉴定未发现一例由D19S400单位点排除父权。15例血痕样品,2例骨头样品、8例精斑样品、4例毛
发样品,检验结果与其它STR位点结果一致。

2.D19S253位点:50例亲子鉴定中联合排除父权的12例。其中D19S253位点参与排除父权8例。10
例血痕样品,2例骨头样品,3例精斑样品,2例毛发样品检验结果与其它STR位点结果一致。

3.D18S535位点: 50例亲子鉴定中联合排除父权的12例。其中D18S535位点参与排除父权7例,10例血痕样品,2例骨
头样品,3例精斑样品,2例毛发样品检验结果与其它STR位点结果一致。
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讨论

D19S400在中国汉族群的群体遗传学资料表明: 该位点个人识别机率为0.9438, 非父排除概率为0.6423。本次应用研究共作了83例亲子鉴定,其中17例被排除父权,而D19S400位
点参加排除父权的有13例,未排除父权4例。参加排除父权例数占总排除父权例数的76%。参加排
除父权的位点数最多为9个,最少为3个。在血痕、骨头、精斑和毛发检验中,D19S400位点与其它
位点结果一致。由于该位点易于扩增,重复性好,是个人识别及亲子鉴定较为理想的位点。

D19S253在中国汉族群的群体遗传学资料表明: 该位点个人识别机率为0.94, 非父排除概率为0.6376。本次应用研究共作了50例亲子鉴定,其中12例被排除父权,而D19S253位
点参加排除父权的有8例,未排除父权4例。参加排除父权例数占总排除父权例数的66%。参加排除
父权的位点数最多为8个,最少为3个。在血痕、骨头、精斑和毛发检验中,D19S253位点与其它位
点结果一致。由于该位点易于扩增,重复性好,是个人识别及亲子鉴定较为理想的位点。

D18S535在中国汉族群的群体遗传学资料表明: 该位点个人识别机率为0.92, 非父排除概率为0.5755。本次应用研究共作了50例亲子鉴定,其中12例被排除父权,而D18S535位
点参加排除父权的有7例,未排除父权5例。参加排除父权例数占总排除父权例数的51%。参加排除
父权的位点数最多为7个,最少为3个。在血痕、骨头、精斑和毛发检验中,D18S535位点与其它位
点结果一致。由于该位点易于扩增,重复性好,是个人识别及亲子鉴定较为理想的位点。

D19S400、D19S253和D18S535位点在上述50例亲子鉴定中未发现一例单独排除父权的现象。

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