云南红河州汉族人群12个Y-STR基因座的遗传多态性调查

DYS385基因座检出三带型等位基因3例

张晓红¹，唐建新¹，陈玥¹，闫耀东¹，吴微微²

（1.广东省广州市公安局番禺区分局，广东广州511400；

2.浙江省公安厅刑侦总队，浙江杭州310009）

Y染色体是性染色体，与常染色体相比较，有其本身的遗传特性：为正常男性特有、呈单倍型连锁遗传及父系遗传。因此常用于通过家系排查犯罪嫌疑人、涉及男女混合斑迹、多个男性混合斑迹的刑事案件及父权鉴定等方面^[1]。

普通的Y-STR基因座，一个样本的分型只有一条带，而DYS385基因座为纯合子时表现为一条带，为杂合子时则表现为两条带。本实验室在日常检案中，发现3例DYS385基因座检见三条谱带，现报道如下：

1 材料与方法

1.1样本

3份血样来自本实验室日常检案积累。

1.2方法

1.2.1试剂 5％CHELEX-100，Powerplex®Y System荧光标记复合扩增试剂盒（Promega公司）；红色荧光标记的ILS 600内标（Promega公司）；Taq Gold^TMDNA聚合酶（ABI公司）；POP-4液态胶（ABI公司）；10×电泳缓冲液（ABI公司）；47cm×50um的毛细管（ABI公司）。

1.2.2仪器 480扩增仪（HEMA公司），9700扩增仪（ABI公司），310测序仪（ABI公司）。

1.2.3步骤血样均采用chelex-100快速法提取DNA。^[2]取上清扩增，产物用ABI 310型基因分析仪进行检测。

2 实验结果

3份血样均在DYS385基因座检见三条谱带。如图1。

图1.分别来自三份样本中检见3条PCR谱带的DYS385基因座

3 讨论

本文的3份血样均在DYS385基因座检见三条谱带，三条谱带的峰高和峰面积的比例大约为2：1：1；其中两份检出了13/18/19基因型，另一份检出12/13/18基因型；其余的DYS391、DYS389Ⅰ、DYS439、DYS389Ⅱ、DYS438、DYS437、DYS19、DYS392、DYS393、DYS390十个基因座的结果正常。

Y-STR基因座呈单倍型，除拟常染色体区域外，在减数分裂时不与其他染色体发生重组，呈连锁遗传，因此普通的Y-STR基因座，一个样本的分型只有一条带，而DYS385则可以表现为一条带或两条带。这是因为DYS385在Y染色体上有一重复区域，距离超过10kb，侧翼区序列和重复单位序列完全相同，差别仅在于区域Ⅰ和Ⅱ中重复单位的数目，相同则表现为一条带，不同则表现为两条带^[3]。因此一般Y-STR基因座若检见两条以上谱带，或DYS385基因座检见三条以上谱带，均可在一定程度上提示混合样本中的男性人数。但在应用中值得注意的是，对于单个男性样本，不是所有的Y-STR基因座的谱带数均符合上述情形，本实验室日常检案中就发现特例，本文的3份血样均在DYS385基因座检见三条谱带，三条谱带的峰高和峰面积的比例大约为2：1：1；其中两份检出了13/18/19基因型，另一份检出12/13/18基因型；其余的DYS391、DYS389Ⅰ、DYS439、DYS389Ⅱ、DYS438、DYS437、DYS19、DYS392、DYS393、DYS390十个基因座的结果正常（见图1）。这可能是在减数分裂过程中，染色体发生变异，增加了一段重复序列，导致DYS385的一对引物可以同Y染色体上的三个座位结合，故可以检见三个扩增片段。因此在Y-STR基因座位上检出多条谱带时，还应结合其他的多个基因座或者其他Y-STR系统的检验结果，综合分析可能含有的男性人数。

[参考文献]

[1] 郭景元，李伯龄.法医物证学[M].北京：中国人民公安大学出版社，2002：438-439

[2] Walsh Ps,Metzgar DA,Higuchi R. Chelex100 as a medium for simple exrtaction of DNA for PCR-based typing from forensic material .Biotechniques,1991,10(4):506-509

[3] 李万水，胡兰，陈松,等中国汉族人群10个Y染色体STR单倍型第二届全国法医DNA检验技术交流会,2004,166.

【作者简介】张晓红（1973-），女，广东潮阳人，主检法医师，医学学士，主要从事法医DNA检案工作。

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