医用创可贴药垫上微量血斑的DNA检验1例

张杰¹，彭磊¹，李素平²

（1泰安市公安局刑警支队，山东，泰安，271000 ，2宁阳县公安局，山东，宁阳，271400）

[关键词]法医物证学；创可贴；DNA提取；STR分型

2005年10月，我市某区发生1起抢劫杀人案，现场提取邦迪牌创可贴1个，其药垫上有微量血斑。创可贴药垫上浸有的消炎药物等成份对DNA检验是否有影响尚未见报道，本文经检验成功进行了STR分型，现报告如下。

1 DNA检验

1.1 DNA提取

剪取创可贴药垫上血斑3mm×3mm放入1.5ml Eppendorf管中，加入纯水1ml，洗涤3次，沉渣中加入100µl 5% Chelex-100，56℃水浴2h，100℃煮沸8min，12 000rpm离心5min，上清备用。

1.2 PCR扩增与检测

用Identifiler试剂盒（ABI公司）进行荧光STR复合扩增，反应总体积10μl，含Reaction Mix 4.2µL，Primer Set2.4µL，金牌Taq酶0.2µL，模板DNA1.0µL，剩余用水补齐。在GeneAmp^®9700型扩增仪（PE，USA）上进行PCR扩增反应，条件为95℃11mim，然后94℃1mim，59℃1min，72℃1min，共28个循环，最后60℃延伸60min。扩增产物经ABI PRISM^TM3100-Avant遗传分析仪进行检测分型，按说明书进行。

2 结果与讨论

2.1结果

创可贴药垫上血斑的STR分型见图1。

2.2讨论

医用创可贴具有消炎、止血、护创的作用，是我们日常生活中常用的一种外科用药，使用十分广泛^[1]。药垫上的药物主要有苯扎氯铵、呋喃西林、乳酸依沙吖啶3类，均为广谱抗菌药物，其理化性质、作用机理不同。

市售创可贴种类繁多，使用的药物等成份也不尽相同。当遇到这类检材时，最好选用同类的创可贴先行预实验，再进行案件检材的检验，以防失败浪费检材。本文在正式检验前，先期用含苯扎氯铵、呋喃西林、乳酸依沙吖啶药物的3种创可贴进行试验，发现经纯3次洗涤后，再用常规的Chelex-100法^[2]提取DNA，得到的STR分型结果很好。大部分消炎药物能溶于水，多次洗涤能减少所含药物等成份的干扰，但洗涤次数不易过多，因血细胞的量也在减少，以三次为宜，PCR扩增时，模板DNA加入的量要比常规血痕扩增时用量要大些。法医DNA检材千差万别，不同检材需有不同的处理方法，先行预实验是很一种有效的方法，尤其对一些量少质弱的检材更是如此。按本文方法进行创可贴药垫上的血斑DNA检验是简单易行的。

[参考文献]

[1] 宋功成.浅谈创可贴的设计、生产及发展趋势[J]. 医疗卫生装备.2002,6:31-33.

[2] Walsh PS ,Metzger DA ,Higuchi R. Chelex 100 as a mediumfor simple extraction of DNA for PCR2based typing from forensic material [J ] .Biotechniques ,1991 ,10 (4) :506-513.

[作者简介] 张杰（1971-），男，山东泰安人，主检法医师，主要从事法医DNA检案研究。联系

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