Identifiler Kit在单亲亲子鉴定中

2个STR基因座不符排除1例

张杰，彭磊，唐光峰

（泰安市公安局刑警支队，山东，泰安，271000）

美国ABI公司生产的Identifiler试剂盒含有15个常染色体STR基因座和1个性别位点，个体识别率和累积非父排除率高，且一次复合扩增完成，操作简便，已越来越多地用于法医检案和亲子鉴定工作。本文在用Identifiler试剂盒进行尸源查找时，发现了2个STR基因座不符合孟德尔遗传定律排除的情况，现报告如下。

1 材料与方法

1.1案情与检材

2004年8月，我市某风景名胜区发现一无名男尸，身着道士服，已高度腐败。后杨甲来认领，说是其失踪多日弟弟杨乙（系道士）。因凭尸表，不能确认，要求进行亲权鉴定。检材为无名男尸软肋一块（编为1号），杨甲之母亲干血（编为2号）、杨甲干血（编为3号）、杨甲之姐姐干血（编为4号）。

1.2试剂与仪器

Chelex-100(Bio-Rad公司)，Identifiler试剂盒（ABI公司），9700型PCR扩增仪（ABI公司），3100－Avant型遗传分析仪（ABI公司）。

1.3方法

用Chelex-100法提取模板DNA；反应体系总体积为10цl，取模板DNA2.0цl，Reaction Mix 4цl，Primer Set 2цl，金标Taq酶0.2цl，ddH2O2.0цl，反应在9700型PCR扩增仪上进行；利用3100－Avant型遗传分析仪进行电泳检测分型。扩增、电泳条件按试剂盒操作手册进行。

2结  果

检材

基　　　　　　　　因　　　　　　　　座

D8S1179

D21S11

D7S820

CSF1P0

D3S1358

TH01

D13S317

D16S539

1号

13/15

30

9/10

12

15/16

9

11/12

10/12

2号

12/14

29/30

10/12

10/11

16/17

9

8/11

12

3号

14/15

29

8/10

11

17

9

8/11

11/12

4号

11/12

30/32

10/12

7/10

16/17

7/9

11

11/12

检材

基　　　　　　　　因　　　　　　　　座

D2S1338

D19S433

VWA

TPOX

D18S51

D5S818

FGA

AME

1号

18/24

13/14

14/18

8/11

14/15

10/12

21/22

XY

2号

18/20

13

14/17

8

14/15

12/13

22/24

X

3号

19/20

13/15.2

14

8

15/19

11/13

24/26

XY

4号

19/20

13/15.2

14/17

8

14/16

11/13

24/26

X

无名男尸与杨甲之母在15个STR位点上除D8S1179及CSF1PO两基因座外，其它13个STR基因座均符合孟德尔遗传定律；吕德坚［1］等人研究表明在单亲亲子鉴定中单步突变［2］不能作为判断突变的参考。据此本案例，至少D8S1179基因座不是突变的结果，故排除亲子关系，即死者不是杨乙。由杨甲之母亲、杨甲及杨甲之姐姐的基因型推测杨甲之父亲的基因型，无名男尸至少在D21S11、CSF1PO、D18S51位点上与杨甲之父亲不符合孟德尔遗传规律，在D7S820位点上与杨甲之父、母混合基因型不符，也排除亲子关系。

3 讨  论

德国亲子鉴定专家证人协会(the German Association of Expert Witnesses for Paternity testing)规定要有3个或3个以上的STR基因座的遗传违反孟德尔遗传定律，才能否定亲生关系［3］。方建新[4,5]等人研究表明在排除亲权母亲-孩子-假设父亲三联体组中,所有观察案例其出现的排除指标数都在三个以上,平均排除指标数为6.63个。在孩子-假设父亲二联体组中,94%的观察案例出现的排除指标数都在三个以上,平均排除指标数为5.01个。当有1~2个STR位点“不符合孟德尔遗传定律”时，要仔细分析，慎下结论。本案例因被检人只有母亲，先行单亲亲子鉴定，恰恰有2个STR基因座不符合孟德尔遗传定律，据吕德坚［1］等人研究表明在单亲亲子鉴定中单步突变不能作为判断突变的参考，做出排除结论。因杨甲之弟在我处当道士且失踪，现场条件十分相似，杨甲不服该结论，为慎重，又加做杨甲及其姐姐的基因型来反推其父亲的基因型，进一步证实排除是正确的。后查明无名男尸为河北省广平县人（系出家道士），因道教内交流来我处。而杨甲为广西省梧州藤县人，二者地理位置相距遥远且无任何血缘关系，15个STR基因座中就有13个符合孟德尔遗传定律，说明用STR进行单亲亲子鉴定时，当有1~2个STR位点“不符合孟德尔遗传定律”时，且为单步突变，，虽STR位点突变率较高［2］，首先不要考虑是突变所致。本文也说明了，利用有多个常染色体STR基因座符合遗传规律来推测有否血缘关系是不正确的，理论根据是不充分的。

【参考文献】

[1] 吕德坚，刘秋玲，陆惠玲等.15个STR在单亲亲子鉴定中的排除分析.中国法医学杂志，2003，18（6）：332－334.

[2] Brinkmann B, Klintschar M, Neuhuber F, et al. Mutation rate in human microsatellites:Influence of the structure and length of the tandem repeat[J].Am J Hum Genet, 1998, 62(6):1408-1415.

[3] Kayser M, Sajantila A. Mutation at Y-STR loci: implications for paternity testing and forensic analysis[J].Forensic Sci Int, 2001, 118(2~3):116-121.

[4] 方建新,刘锡杰,程大霖. CODIS位点在排除亲权中的应用价值.法医学杂志,2001,17(2):86-885　

[5] 方建新,程大霖.亲子鉴定中STR位点数选择及其应用价值研究.法医学杂志,2002,18(2):19-21

 

张杰的手机号:135628099971;0538-8229455(办).

单位:泰安市公安局刑警支队,邮编:271000

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