啤酒盖上DNA的鉴定和体会

高金林，李贻乐，徐庆，裴军昌，戴小兵

（江苏省泰州市公安局刑警支队, 江苏 泰州 225300）

【关键词】啤酒瓶盖、DNA

自从DNA检验技术在我国应用以来，在打击犯罪的过程中起着越来越大的作用。特别PCR-STR技术普及后，DNA检验技术已成为生物物证鉴定的重要工具。以下是向大家介绍在侦破我市发生的案件中DNA检验技术所发挥的作用和心得。

1案例资料

2005年12月5日，我市某宾馆发生一起麻醉抢劫案件。分局技术人员将2个烟头、啤酒瓶送检。检验时发现啤酒瓶内的酒未喝过，因此啤酒瓶口检验后无DNA。2个烟头检验后发现烟头上DNA为受害人所留。我局刑警支队技术人员紧急赶到现场重新进行勘查，发现一枚啤酒瓶盖上有咬痕，经向受害人了解，得知犯罪分子是用嘴咬开啤酒瓶的。故技术人员将啤酒瓶盖送检。

2 检验

2.1 检材处理

取少量脱脂棉，用水浸湿后，檫拭啤酒瓶盖，再放入1.5ml试管中。

2.2 DNA提取

在1.5ml试管中加入5%Chelex至浸没，再入1-3ulPK(10mg/ml)。震荡后放入56℃金属浴中20分钟。震荡后放入100℃金属浴中8分钟，13000rpm离心3分钟取上清。估计上清体积，加入2.5倍体积的乙醇，充分混合。-20℃放置30分钟以上，沉淀DNA，13000rpm离心3分钟，弃上清液，真空干燥或通风橱挥发乙醇，加入20ulTE，震荡后56℃30分钟。

2.3 PCR扩增

用ABI公司提供的ABI-Plus试剂盒10ul体积扩增，其中：PCR反应混合物4.2ul，引物1ul，Taq酶0.2ul，模板1-4.6ul，用水补足体积。反应条件为：95℃×11min×1cycle,94℃×1min/59℃×1min /72℃×1min×28 cycle,60℃×45min.

2.4 电泳

扩增产物经ABI3100A型DNA基因分析仪电泳分离和激光扫描。10 ul甲酰胺中加入0.2 ulGenescanROX500作为分子量内标和1 ul扩增产物。

2.5检验结果

	D3S1358	vWA	FGA	D8S1179	D21S11	D18S51	D5S818	D13S317	D7S820	Amelo
啤酒瓶盖	16/18	16/18	23	13/14	29/30	14	10/13	8/11	8/9	XY

3讨论

在犯罪现场中，技术人员对生物性检材的收集不够重视，责任心不强，勘查现场时不够仔细，导致DNA物证少提、漏提，给案件侦破带来不必要的困难。值得肯定的是在本案中侦查人员对犯罪现场的保护工作是非常到位的，保证了有效的现场勘查结果。

在各种犯罪现场中，血迹、精斑等生物检材是法医勘验的首选。但是在当今信息化的时代，犯罪分子通过各种渠道得到犯罪相关信息，使其犯罪经验得到积累。因此在一些疑难案件中，很难在现场发现血斑、精斑等易发现的现场检材，在此类案件中，唾液、毛发等不易发现的检材才是破案的关键。

本案中啤酒瓶盖上斑迹因属于唾液斑。对于唾液斑的提取，现多推荐两根纱线法，但两条纱线法与载体接触面积较小，对于大面积不可见斑迹擦拭效果并不明显。用脱脂棉檫拭载体，接触面积增大，比较容易将载体上的上皮细胞转移下来。

chelex 法提取与其它DNA提取方法比较，chelex法灵敏度较高，但易在提取时带入抑制剂。相比较而言硅珠法提取DNA带入的抑制剂较少，可在扩增时加大模板量使扩增效果增加。这就对技术人员提出较高的要求，要求知道检材在什么情况用什么样的提取方法。

对于一些疑难检材，在DNA提取后应用适当的方法对DNA加以浓缩以增加待测检材的DNA模板浓度，使DNA扩增能够顺利进行。