水浸泡五天钢丝线上脱落细胞DNA检验1例

王 军，王季中

（连云港市公安局刑警支队，江苏 连云港  222003）

【关键词】法医物证学；脱落细胞；DNA检验

1  简要案情

2005年9月27日中午，灌南县田楼乡潘某报案称其丈夫孙某于9月24日凌晨4时30分开马自达三轮车去进货至今未归。9月29日下午，在田楼乡境内沂南河中发现一浸没马自达三轮车，打捞后发现孙某尸体仰坐在马自达驾驶座位上，犯罪分子将钢丝线一端做成活扣，紧套在死者颈部，另一端通过车厢前窗口缠绕在车厢内的铁管上。经检验，钢丝线上微量脱落细胞检出完整DNA分型，经比对认定陆某(被害人孙某邻居)血样与现场钢丝线上遗留的微量脱落细胞DNA分型一致，从而破获该案。

2  检  验

2.1  检材检查及提取

送检的检材为一根废旧的摩托车离合器钢丝线，直径2mm，表皮被剥去。钢丝线已在河水中浸泡近五个昼夜，上面还粘附较多的淤泥。取少许灭菌脱脂棉纱用去离子水浸润由表向里逐层将钢丝线表面淤泥十分小心地轻轻拭去，然后用少许湿棉纱反复多次擦拭钢丝线缠绕钢管的部位，及时装入0.6mlAxygen管中。

2.2  DNA提取

按硅珠法提取DNA［1］。将装有擦拭棉纱Axygen管中加入TES 100μl，10％SLS 20μl，振荡10s。99℃干浴8min，振荡后加入吸附液300μl，振荡 12000r 离心2min，将上清液转移至新收集管，加入硅珠悬液20μl，放置30min， 8000r离心10s，去上清，加入漂洗液300μl洗涤1次，8000r离心,再用－20℃70％乙醇洗涤两次，离心沉淀于60℃干浴至硅珠干燥，加入去离子水8μl，56℃保温15min，12000r 离心2min取上清待PCR扩增。

2.3  PCR扩增及检测

扩增引物采用ABI公司提供的AmpFISTR®IdentifilerTM试剂盒。扩增总体积6μl。其中含：PCR反应混合物2μl，引物1μl，Taq聚合酶0.1μl,模板DNA3μl。反应条件为:95℃预变性11min， 94℃变性1min，59℃退火1min，72℃延伸1min，循环32次, 60℃延伸60min, 4℃保存。

扩增产物取2μl经ABI 310型基因分析仪电泳荧光检测，检测结果见图1。
 
 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 


图1 钢丝线脱落细胞擦拭检测结果

3 讨 论

本案由于现场条件极差，犯罪分子遗留在现场的只有在河水中浸泡了五天的离合钢丝线。钢丝线上犯罪嫌疑人微量脱落细胞DNA的成功检出，为该案的破获发挥了决定性作用。本案成功经验主要有以下几点：一DNA检验技术人员必须亲自到案发现场，吃透案情，准确地分析研究犯罪嫌疑人作案时的加害动作，最终确定犯罪嫌疑人加害动作中最有可能留下脱落细胞的接触部位。二DNA检验人员要有认真负责、细致严谨的工作作风，处理检材要像显微外科医生对待微血管手术一样耐心细致、一丝不苟。要牢固树立不提取到犯罪物证誓不罢休的精神。三DNA检验人员在对微量DNA检材的提取处理前，首先要设计好提取方案。要在对相同条件下模拟检材提取检验成功后，再行对案件检材的处理提取。以确保微量DNA检验成功。四实践证明，选用硅珠法进行微量DNA检验是目前灵敏度比较高的方法，本案模板DNA未经纯化情况下直接进行PCR扩增，检测结果是非常理想的。

综上所述，要想提取到微量犯罪生物物证我们DNA检验人员就必须亲自到案件现场，吃透案情，客观分析犯罪嫌疑人作案时可能留下其微量生物物证的部位，选择合适的提取方法。同时检验人员要具备高度负责、耐心细致的优良工作作风。只有这样才能最终发现提取到犯罪证据，认定罪犯。

【参考文献】

［1］ 王林生，苏勇，顾林岗. 硅珠法提取PCR模板DNA［J］.中国法医学杂志,2000,15(1):36-37.

【作者简介】王军（1977－），男，江苏东海人，法医师，学士，主要从事法医DNA检验工作。

 

地址：江苏省连云港市新浦区陇西路3号  邮编：222003

电话：13851279799   0518－2290596     E-mail：wjdna@163.com