一例强奸杀人案件的DNA检验

周如华，周钱颖 

（苏州市公安局刑警支队，江苏 苏州215002）

【关键词】DNA；Chelex-100法；硅珠法

1案件资料

1.1简要案情

2002年10月2日下午，吴江刑大接报案称黎里镇何扇村一水稻田里发现一具无名女尸。经走访排摸确认位继红（男，73年生，河南省商水县邓城镇人）有重大作案嫌疑。并在其携带的行李箱内找到带有泥水的衣物。经进一步审查，位交代：10月1日夜，与死者芮铭庭等人在一起喝酒，酒后位继红提出让送芮铭庭送他回去，在路上，位起了强奸歹念，并故意挑逗芮，遭拒绝后，位害怕事情败露，就用捂芮的嘴，直至芮昏死过去，之后对芮实施了强奸并移尸掩埋的犯罪事实。

1.2检验

1.2.1 材料   现场提取受害人芮铭庭阴道拭子，沾染泥土，PSA(弱阳性),检见精子；嫌疑人位继红血样。试剂选用：Chelex-100（Bi-Rad公司），硅珠法；Profiler Plus试剂盒（ABI公司）。主要仪器选用DU-800核酸分析仪（BECKMAN 公司），9700型PCR扩增仪（ABI公司），310基因分析仪（ABI公司）。

1.2.2方法  所有检材均用Chelex-100及硅珠法提取法提取DNA（芮铭庭阴道拭子及嫌疑人位继红血样各分二份，Chelex-100抽提DNA依次编为1、2号检材；硅珠法抽提DNA依次编为3、4号检材）反应体系总体积为10ul，含DNA摸板1ng溶液4ul（经DU-800核酸分析仪定量），PCR反应混合液6ul，Reaction Mix 4ul，Primer Set 2ul，Ampli Taq Gold 0.2ul 。反应在9700型扩增仪上进行。扩增条件按试剂盒操作手册进行。

2 结果与讨论

2份检材检验结果见表1：

表1  检验结果

位点

D3S1358

vWA

FGA

Amel

D8S1179

D21S11

D18S51

D5S818

D13S317

D7S820

1号

15/18

 

 

X/Y

10/11

 

 

10/12

 

 

2号

15/18

17/17

22/23

X/Y

10/11

29/32.2

15/17

10/12

8/11

8/12

3号

15/18

17/17

22/23

X/Y

10/11

29/32.2

15/17

10/12

8/11

8/12

4号

15/18

17/17

22/23

X/Y

10/11

29/32.2

15/17

10/12

8/11

8/12

 

受害人芮铭庭阴道拭子与嫌疑人位继红血样的Profiler Plus基因型相同，似然比（LR）为：1.651E+11。

此案由于嫌疑人位继红具有一定的反侦查经验（嫌疑人位继红强奸杀害受害人芮铭庭后在其阴道内填塞泥浆并掩埋）致使检验过程颇费周折。血样的检验Chelex-100法与硅珠法无明显差异，结果均很好。但Chelex-100法芮铭庭阴道拭子中精子的检验几近失败，只出现3对等位基因，位点不全；再经硅珠法抽提DNA ，Profiler Plus试剂盒扩增成功检验出芮铭庭阴道拭子上精子的DNA基因型。比较两种DNA抽提法，主要在于对含有泥土的精子的方法的优劣：Chelex-100是一种化学鳌合树脂含有成对的亚氨基二乙酸盐例子，鳌合多价金属离子，尤其是选择性鳌合二价例子，能结合许多可能影响下一步分析的其他外源物质，但底物核膜及其他试剂一起保留下来，DNA浓度不高。硅珠DNA提取法是在高浓度的硫氰酸呱的存在下，DNA被二氧化硅特异性地吸附，被吸附的DNA在没有硫氰酸呱存在下，DNA又从二氧化硅中释放出来。硫氰酸呱是高性能的蛋白变性剂，可以使蛋白质与DNA分离，在硅珠吸附前高速离心可以将变性的蛋白质、泥土等不溶物除去，因此提取的比较纯。此案前期处理基本相同：通过差异裂解法去除女性成分，Chelex-100法由于底物中含有较多的泥土无法去除，而泥土对于扩增又起到抑制作用，致使DNA检验失败；硅珠法正是由于将泥土等一些对扩增有抑制的杂质去除，使DNA检验成功。所以对于斑迹载体材料（如树片、泥土、蓝色牛仔裤、玻璃）、斑迹形成前或过程中或形成后加入的化学物（精子灭活剂、洗涤剂、苏打等）都会影响样品的提取扩增和分析，在使用常规DNA抽提法效果不是很理想时，不妨考虑使用硅珠DNA提取法，常常会化复杂为简单，化腐朽为神奇，为一些疑难案件提供重要的证据。

【参考文献】

[1] 郑秀芬.北京：中国人民公安大学出版社，ISBN7-81059-965-8/D.818.

 

作者简介：

周如华,男，1977，法医学士，主要从事DNA检验工作，联系电话：0512-66333266;

周钱颖,女，1980，法医学士，主要从事DNA检验工作，联系电话：0512-68686895

 

作者简介：周如华，男，法医学学士，苏州市公安局刑警支队，联系电话：051266333266，邮编：215002，Email:zhouruhuadna@126.com