带血手套腕部微量上皮细胞DNA检验一例
马原1 ，裴黎2 ，涂政2，彭建雄2
（1.中国人民公安大学 北京 100038；2.公安部物证鉴定中心 北京 100038）
自从PCR 技术应用到生物物证的检验,尤其是应用荧光复合STR 基因座进行分析,使微量生物检材的检测成为可能[1]。在刑事案件中，与人体表接触过的衣服、手套等常粘附有体表脱落上皮细胞,如能对此进行检验并成功获得DNA分型数据，将为案件的侦破提供重要的线索和证据。通常情况下，因脱落上皮细胞量非常少,在检验过程中又缺乏稳定的方法,常常导致检验结果不理想。本文作者通过对一例棉线手套腕部上的脱落上皮细胞成功地进行STR分型, 为极微量体表脱落上皮细胞的检验提供了一种切实可行的方法。
1 案例简介
2005年12月，某商店内发生入室抢劫案，两名妇女被杀害，现场遗留的多处血迹经检验系被害人所留，在距案发现场东
2 检测方法
（1）尽量剪取手套手腕处肉眼看不到血迹的地方,剪碎后置于5ml灭菌塑料管中，加入适量无菌水浸泡，放入Hb试纸条，检验结果为阴性，排除了人血迹的污染。（2）将管中的无菌水吸出后加入适量已配好的磁珠裂解液（DNA IQTM
试剂盒提供）和PK（终浓度为200ug/ ml）浸泡载体,震荡后放入
图1 手套腕部上皮细胞的STR分型结果
3 结果与讨论
采用上述方法获取手套腕部上皮细胞的STR 分型结果见上图1，经比对与现场多处血迹及受害人血样的STR分型完全不同。
物证污染是影响物证鉴定结果的最重要因素之一,一直受到各方面的极大关注[2]，从现场到实验室是多环节的链状关系，各环节都有发生污染的可能。作者经常遇到所送案件的检材因基层办案人员提取和保存不规范，而被污染并失去检验条件的情况。例如同一份检材的不同部位可能含有不同个体的细胞，如果提取和保存不当，就极有可能造成相互污染，使检测变得困难。本案例中，检材的提取和保存较为规范，送检手套未与其他检材特别是对照检材混装，而是单独用纸袋包装，重要的是将手套阴干后再包装并且没有将手套折叠，这就最大限度的保证了案发现场手套的原始状态，同时也防止了手套上的血迹在折叠中扩散、污染。另外在DNA检验过程中，也要防止人为的污染。为了最大限度地避免污染,在操作过程中应该遵循以下一些原则[3]: ①DNA提取和PCR加样要在单独的超净实验室中进行,操作人员必须穿戴一次性手套、衣服及面罩,操作台及设备必须经常清洗和用紫外灯照射;②PCR扩增要在单独的实验室或区域中进行,实验的每一步均要使用阴性对照以确定是否存在污染;③尽可能地重复进行PCR检验,其检验结果必须与所有参与操作人员的DNA分型进行比较,必要时,与现场检材提取或案件调查人员的DNA分型进行比较。
在本案中，手套上的血迹量较多且已检测出为受害人所留，从实际情况看，该手套平常与人体接触多的手指和掌部均有血迹并且上面的脏物也较多。作者通过观察考虑到手套上与人体摩擦较多的手腕部位也会留下少量的脱落上皮细胞且不易沾染上血迹，于是尽量剪取手套上肉眼看不到血迹且与皮肤接触较多的手腕部位，并进行了人血痕的确证试验，结果为阴性，从而证明了剪取的部位没有血迹。另外在DNA 提取过程中采用磁珠裂解液加入PK 置
许多实际办案工作中所涉及的现场检材往往含有微量生物物证的检材，能否发现这些微量生物物证所富集的区域并成功地提取出DNA，往往对确认罪犯和为案件提供破案线索具有重要意义。本文所建立的方法对微量上皮脱落细胞的检测获得了满意的效果，因此可为侦查和审判提供起决定作用的线索和证据。
【参考文献】
[1] 吴梅筠,徐振波. 短串联重复序列基因座复合扩增研究进展[J]. 中国法医学杂志,1999 ,14 (1) :52～56
[2] 王桂强. 物证鉴定中的物证污染问题[J]. 刑事技术，2005，5：6
[3] Gill P. Application of low copy number DNA profiling
[J].Croatian MedicalJournal,2001,42:229
[4] 裴黎，现代DNA分析技术理论与方法[M]，北京:中国人民公安大学出版社,2002，127-135
[作者简介]
马原（1981-），男，山东济宁人，中国人民公安大学法医遗传专业在读研究生，（电子信箱）mayua1017@hotmail.com